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應(yīng)用案例
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通過微液滴輔助適應(yīng)性進化快速實現(xiàn)氧化葡糖桿菌對高D-山梨醇濃度和高溫的耐受性

來源:   作者: 發(fā)布日期:2023-06-15 訪問量:2235

       本期為您推薦江南大學(xué)周景文教授研究團隊發(fā)表在《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology》(IF=6.064)上的一篇文章:Rapid Enabling of Gluconobacter oxydans Resistance to High D-Sorbitol Concentration and High Temperature by Microdroplet-Aided Adaptive Evolution. 該研究使用液滴微流控技術(shù)(Microbial Microdroplet Culture system,MMC)對Gluconobacter oxydans WSH-004進行適應(yīng)性進化,經(jīng)過約90d的馴化得到最佳菌株MMC10,該菌株對高濃度底物和高溫的耐受性顯著提高,能在40°C下、含300 g/L D-山梨醇的培養(yǎng)基中生長[1]。

       氧化葡糖桿菌能夠合成L-山梨糖,但其高濃度底物D-山梨醇會對發(fā)酵過程造成嚴(yán)重抑制。補料分批發(fā)酵可以緩解底物抑制,但會增加生產(chǎn)成本和污染風(fēng)險。因此需要獲得一種能耐受更高D-山梨醇濃度的氧化葡糖桿菌,以緩解底物的抑制作用。為直接提高微生物對不利環(huán)境脅迫的耐受性,適應(yīng)性進化是在特定環(huán)境條件下進化微生物的有效方法,與傳統(tǒng)的自適應(yīng)性進化相比,MMC的應(yīng)用可以減少時間和,簡化實驗過程,提高效率。

       本研究旨在利用MMC對Gluconobacter oxydans WSH-004進行適應(yīng)性進化,以提高其對高濃度底物和高溫的耐受性。經(jīng)過約90d的進化實驗后,獲得了多個適應(yīng)性進化的菌株,即Gluconobacter oxydans MMC1-MMC10。結(jié)果表明,最佳菌株MMC10在40°C下、含300 g/L D-山梨醇的培養(yǎng)基中生長。比較基因組分析顯示,與耐受性增加相關(guān)的遺傳變化主要發(fā)生在蛋白質(zhì)翻譯基因中。這項研究表明,液滴微流控技術(shù)是在短時間內(nèi)改善未闡明基因型表型的有效工具。

圖片1

圖片2

圖片3



[1] Liu L, Zeng W, Yu S, Li J and Zhou J (2021) Rapid Enabling of Gluconobacter oxydans Resistance to High D-Sorbitol Concentration and High Temperature by MicrodropletAided Adaptive Evolution. Front. Bioeng. Biotechnol. 9:731247.

 

doi: 10.3389/fbioe.2021.731247


       本期為您推薦江南大學(xué)周景文教授研究團隊發(fā)表在《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology》(IF=6.064)上的一篇文章:Rapid Enabling of Gluconobacter oxydans Resistance to High D-Sorbitol Concentration and High Temperature by Microdroplet-Aided Adaptive Evolution. 該研究使用液滴微流控技術(shù)(Microbial Microdroplet Culture system,MMC)對Gluconobacter oxydans WSH-004進行適應(yīng)性進化,經(jīng)過約90d的馴化得到最佳菌株MMC10,該菌株對高濃度底物和高溫的耐受性顯著提高,能在40°C下、含300 g/L D-山梨醇的培養(yǎng)基中生長[1]。

       氧化葡糖桿菌能夠合成L-山梨糖,但其高濃度底物D-山梨醇會對發(fā)酵過程造成嚴(yán)重抑制。補料分批發(fā)酵可以緩解底物抑制,但會增加生產(chǎn)成本和污染風(fēng)險。因此需要獲得一種能耐受更高D-山梨醇濃度的氧化葡糖桿菌,以緩解底物的抑制作用。為直接提高微生物對不利環(huán)境脅迫的耐受性,適應(yīng)性進化是在特定環(huán)境條件下進化微生物的有效方法,與傳統(tǒng)的自適應(yīng)性進化相比,MMC的應(yīng)用可以減少時間和,簡化實驗過程,提高效率。

       本研究旨在利用MMC對Gluconobacter oxydans WSH-004進行適應(yīng)性進化,以提高其對高濃度底物和高溫的耐受性。經(jīng)過約90d的進化實驗后,獲得了多個適應(yīng)性進化的菌株,即Gluconobacter oxydans MMC1-MMC10。結(jié)果表明,最佳菌株MMC10在40°C下、含300 g/L D-山梨醇的培養(yǎng)基中生長。比較基因組分析顯示,與耐受性增加相關(guān)的遺傳變化主要發(fā)生在蛋白質(zhì)翻譯基因中。這項研究表明,液滴微流控技術(shù)是在短時間內(nèi)改善未闡明基因型表型的有效工具。

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[1] Liu L, Zeng W, Yu S, Li J and Zhou J (2021) Rapid Enabling of Gluconobacter oxydans Resistance to High D-Sorbitol Concentration and High Temperature by MicrodropletAided Adaptive Evolution. Front. Bioeng. Biotechnol. 9:731247.

 

doi: 10.3389/fbioe.2021.731247


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